是不是自己的親生骨肉,通過DNA技術(shù)做親子鑒定便知真假,植物也是如此。枸杞DNA條形碼鑒別技術(shù),便是枸杞的“親子鑒定”技術(shù)。
針對枸杞種質(zhì)資源遺傳背景不清、優(yōu)異資源挖掘和利用滯后等問題,寧夏農(nóng)林科學(xué)院枸杞工程技術(shù)研究所通過枸杞DNA基因序列分析,從分子水平開展枸杞種質(zhì)資源遺傳多樣性研究,建立枸杞屬植物DNA條形碼的基因序列數(shù)據(jù)庫,為枸杞種質(zhì)資源挖掘利用提供理論依據(jù)。
DNA條形碼是一種有關(guān)物種鑒定的新技術(shù),用標(biāo)準(zhǔn)化、較短的DNA序列作為條形碼,即可實(shí)現(xiàn)對物種快速、準(zhǔn)確地鑒定。植物DNA條形碼技術(shù)憑借其客觀、準(zhǔn)確的鑒定優(yōu)勢對于中醫(yī)藥的現(xiàn)代化、精準(zhǔn)化起到了關(guān)鍵作用。
“課題組建立的適宜于枸杞DNA條形碼鑒別技術(shù),在國際上率先取得枸杞基因自主知識產(chǎn)權(quán)。”課題組負(fù)責(zé)人石志剛向記者介紹,該技校采用枸杞葉綠體編碼基因、葉綠體間隔序列和核基因內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔序列及其間隔區(qū)共9個DNA序列作為條形碼候選,通過引物設(shè)計(jì)、PCR、克隆、測序、序列的同源性比對及聚類分析,建立了適宜于枸杞基因序列分析的技術(shù)體系,得到了國內(nèi)外分布的枸杞屬8種3變種不同枸杞種質(zhì)的DNA基因序列422個,在GENBANK注冊基因序列245個。
“率先構(gòu)建了枸杞屬系統(tǒng)發(fā)育樹,基于ITS序列構(gòu)建了中國境內(nèi)分布的枸杞屬系統(tǒng)發(fā)育樹,從分子水平揭示枸杞不同種質(zhì)資源的親緣關(guān)系,基于枸杞DNA條形碼揭示中國境內(nèi)分布枸杞屬不同種與美國境內(nèi)分布枸杞屬種質(zhì)形成各自獨(dú)特的起源和分布中心。”石志剛說,同時(shí),課題組還建立基于枸杞屬植物DNA條形碼的鑒定標(biāo)準(zhǔn),構(gòu)建枸杞種質(zhì)資源的“分子身份證”,明確了綜合評價(jià)指標(biāo)最優(yōu)的基因序列對枸杞不同種質(zhì)的鑒定效率,“由此能夠鑒別出大多數(shù)的枸杞種質(zhì)材料,反映出不同種質(zhì)間的親緣關(guān)系。”
此外,課題組還應(yīng)用ITS基因序列開展枸杞分子標(biāo)記輔助育種,率先建立了早期篩選枸杞航天育種突變體和雜交種鑒定技術(shù)體系,為縮短育種周期、提高育種效率提供了技術(shù)支撐。“依據(jù)ITS序列差異,我們準(zhǔn)確地判明種間雜交種真?zhèn)巍幭蔫坭椒N內(nèi)雜交種真?zhèn)魏秃教焱蛔凅w是在DNA水平發(fā)生了變異。”石志剛說。
據(jù)悉,通過該技術(shù)的研究,目前課題組取得登記成果2項(xiàng),獲得不同枸杞種質(zhì)DNA條形碼基因序列422個,在GENBANK注冊基因序列245個,為進(jìn)一步加快枸杞種質(zhì)資源創(chuàng)新和利用、挖掘優(yōu)異基因、培育新品種、鑒定枸杞種質(zhì)和開展分子標(biāo)記輔助育種奠定了基礎(chǔ)。