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反轉(zhuǎn)錄酶 |
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9068-38-6 |
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中文名稱反轉(zhuǎn)錄酶中文同義詞反轉(zhuǎn)錄酶;AMV反轉(zhuǎn)錄酶;AMV逆轉(zhuǎn)錄酶;M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶;AMVREVERSETRANSCRIPTASE反轉(zhuǎn)錄酶;(PROMEGA原裝).;M-MLV(RNASEH-)反轉(zhuǎn)錄酶;RTL反轉(zhuǎn)錄酶(高濃度)英文名稱REVERSETRANSCRIPTASE英文同義詞Revertase,RNA-directedDNApolymerase;M-MLVREVERSETRANSCRIPTASE;MOLONEYMURINELEUKEMIAVIRUSREVERSETRANSCRIPTASE;Nucleotidyltransferase,deoxyribonucleate,RNA-dependent;REVERSETRANSCRIPTASE,FORMOL.BIOLOGY,DRYICE,500U*;REVERSETRANSCRIPTASEFROMAVIAN*MYELOBLASTOSISVIR;CYSCRIBEREVERSETRANSCRIPTASE;AMVREVERSETRANSCRIPTASE,REC.,INDUSTRIALGMPGRADECAS號(hào)9068-38-6分子式分子量0EINECS號(hào)232-964-5相關(guān)類別DNA修飾酶;氨基酸;酶類;PCR相關(guān);PCR試劑;分子生物學(xué);分子診斷-M-mlv逆轉(zhuǎn)錄酶;分子診斷-RTL反轉(zhuǎn)錄酶;Enzyme;2.7.x.xPhosphoruscontaininggroupsMore...Close...;AmplificationMolecularBiology;cDNALabelingApplicationIndex;PCRPlantMolecularBiology;RT-PCREnzymeClassIndex;2.x.x.xTransferases;FunctionalProfilingofStemCells;GeneExpression&Analysis;MolecularBiologyTested;NucleicAcidAmplification;PCR/Amplification;RT-PCRMolecularBiology;StemCellBiologyMol文件MolFile結(jié)構(gòu)式反轉(zhuǎn)錄酶性質(zhì)儲(chǔ)存條件-20°C形態(tài)液體顏色無(wú)色反轉(zhuǎn)錄酶用途與合成方法概述反轉(zhuǎn)錄酶（Reversetranscripatse）是以RNA為模板指導(dǎo)三磷酸脫氧核苷酸合成互補(bǔ)DNA（cDNA）的酶。反轉(zhuǎn)錄酶是一種依賴RNA的DNA聚合酶，是反轉(zhuǎn)錄病毒特有的一種酶類，凡是反轉(zhuǎn)錄病毒中均攜帶反轉(zhuǎn)錄酶，通過(guò)檢測(cè)反轉(zhuǎn)錄酶活性指標(biāo)可達(dá)到監(jiān)測(cè)生物制品反轉(zhuǎn)錄病毒污染的目的。我們根據(jù)模板噬菌體MS2RNA設(shè)計(jì)引物及探針，建立了檢測(cè)反轉(zhuǎn)錄酶活性的實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析方法，對(duì)生物制品中反轉(zhuǎn)錄酶活性測(cè)定具有較高的應(yīng)用價(jià)值。哺乳類C型病毒的反轉(zhuǎn)錄酶和鼠類B型病毒的反轉(zhuǎn)錄酶都是一條多肽鏈。人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因轉(zhuǎn)染，許旺細(xì)胞48h后，檢測(cè)到人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶mRNA和蛋白水平表達(dá)明顯。鳥(niǎo)類RNA病毒的反轉(zhuǎn)錄酶則由兩上亞基結(jié)構(gòu)。真核生物中也都分離出具有不同結(jié)構(gòu)的反轉(zhuǎn)錄酶。端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶（Telomerasereversetranscriptase，TERT）是端粒酶重要的活性部分。簡(jiǎn)介多反轉(zhuǎn)錄酶都具有多種酶活性，主要包括以下幾種活Chemicalbook性。1、DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過(guò)程。此酶需要RNA為引物，多為色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反轉(zhuǎn)錄酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此沒(méi)有校正功能，所以由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的DNA出錯(cuò)率比較高。2、RNaseH活性；由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子，將由RNaseH從RNA5′端水解掉RNA分子。3、DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性；以反轉(zhuǎn)錄合成的第一條DNA單鏈為模板，以dNTP為底物，再合成第二條DNA分子。除此之外，有些反轉(zhuǎn)錄酶還有DNA內(nèi)切酶活性，這可能與病毒基因整合到宿主細(xì)胞染色體DNA中有關(guān)。反轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)對(duì)于遺傳工程技術(shù)起了很大的推動(dòng)作用，目前它已成為一種重要的工具酶。用組織細(xì)胞提取mRNA并以它為模板，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，合成出互補(bǔ)的DNA(cDNA)，由此可構(gòu)建出cDNA文庫(kù)(cDNalibrary)，從中篩選特異的目的基因，這是在基因工程技術(shù)中最常用的獲得目的基因的方法。圖片反轉(zhuǎn)錄酶凝膠電泳圖。應(yīng)用端粒酶（Telomerase）是一種核糖核蛋白聚合酶，其作用是維持染色體末端的端粒TTAGGG重復(fù)序列的長(zhǎng)度，主要由TERT和RNA模板構(gòu)成。在正常體細(xì)胞中，由于端粒酶活性受到抑制，端粒隨著細(xì)胞的分裂而逐漸縮短，從而使體細(xì)胞的增殖受到限制；而在腫瘤細(xì)胞中，由于端粒酶的持續(xù)表達(dá)，腫瘤細(xì)胞可以維持端粒的長(zhǎng)度并獲得無(wú)限增殖的能力。腫瘤細(xì)胞中TERT基因的上調(diào)涉及多種機(jī)制，包括表觀遺傳學(xué)的改變以及含有TERT基因的位點(diǎn)的擴(kuò)增。近期新發(fā)現(xiàn)的TERT啟動(dòng)子突變揭示了TERT基因激活的另一全新機(jī)制。人TERT基因位于染色體5p15.33，其啟動(dòng)子區(qū)域是端粒酶，表達(dá)最重要的調(diào)控區(qū)域。該啟動(dòng)子核心區(qū)域由260個(gè)堿基對(duì)組成，其中包括E-box結(jié)構(gòu)可與c-Myc結(jié)合激活轉(zhuǎn)錄，此外GC-box可與鋅指轉(zhuǎn)錄因子Sp1結(jié)合。TERT基因的轉(zhuǎn)錄受到多種激素、細(xì)胞因子及癌基因的調(diào)控，如p53可以下調(diào)TERT的轉(zhuǎn)錄。Ets與端粒酶激活密切相關(guān)，其可以被EGF、Her2/Nez、Ras、Raf等刺激。癌基因的激活及抑癌基因的失活誘導(dǎo)TERT的轉(zhuǎn)錄從而導(dǎo)致細(xì)胞永生。此外富含GC區(qū)域還可以通過(guò)表觀遺傳方式調(diào)控TERT的表達(dá)。進(jìn)展隨著對(duì)人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶、端粒和端粒酶結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控機(jī)制研究的不斷深入，人們對(duì)hTEＲT在細(xì)胞永生化以及腫瘤細(xì)胞癌變進(jìn)程中的作用有了新的認(rèn)識(shí)。端粒對(duì)于維持細(xì)胞染色體的穩(wěn)定性非常重要，任何原因造成的端粒長(zhǎng)度過(guò)短均將會(huì)引起基因穩(wěn)定性的改變，而基因不穩(wěn)定則會(huì)增加惡性腫瘤的發(fā)生率。相信hTEＲT將在腫瘤診斷和治療中發(fā)揮更重要的作用。參考文獻(xiàn)[1]孔艷,吳小紅,楊立宏,安祺,董關(guān)木,俞永新.反轉(zhuǎn)錄酶活性檢測(cè)實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法的建立[J].中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù),2010,(06):438-441[2]劉琳琳,鄧為民.人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)染大鼠許旺細(xì)胞的生物學(xué)特性[J].中國(guó)組織工程研究,2015,(14):2250-2254.[3]張磊,李小毅.端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子突變?cè)诩谞钕侔┲械难芯窟M(jìn)展[J].癌癥進(jìn)展,2015,(04):391-395+456.[4]李三黨,劉宏斌.人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶與腫瘤的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2015,(16):2926-2928. |
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