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熒光素酶
CAS No.: 61970-00-1
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備注: 中文名稱熒光素酶中文同義詞重組型酵素;熒光素酶,北美產(chǎn)螢火蟲(螢火蟲);熒光素酶來源于螢火蟲;熒光素酶(螢火蟲);熒光素酶*重組熒光素*;熒光素酶;Luciferasefrom?Photinuspyralis?(firefly),超純級(jí),≥98%(SDS-電泳),凍干粉,15-30×106光單位/毫克蛋白;熒光素酶來源于螢火蟲,超純級(jí),≥98%(SDS-電泳),凍干粉,15-30×106光單位/毫克蛋白英文名稱LUCIFERASE英文同義詞ALKANAL-REDUCEDFMN-OXYGENOXIDOREDUCTASE;LuciferasePhotinuspyralis(firefly);Luciferase,Firefly,Recomb.;Luciferase(fireflyluciferin);LUCIFERASE,RECOMBINANT,FROMLUCIOLAMINGRELICA;LUCIFERASEFROMFIREFLY,WHITEPOWDER,SOLUBLE*;LUCIFERASE,FROMFIREFLYWITH*TRIS-ASPARTICACID;LUCIFERASEFROMFIREFLYSOLUBLE*WITHTRIS-SUCCINICCAS號(hào)61970-00-1分子式分子量0EINECS號(hào)263-359-4相關(guān)類別生化試劑;酶類;生物發(fā)光底物;發(fā)光化合物;生化試劑-酶類;檢驗(yàn)試劑;化學(xué)試劑;生化試劑-酶和輔酶;化學(xué)試劑;對(duì)照品;enzyme;ChemiluminescentcompoundsAnalyticalEnzymes;PurifiedEnzymesEnzymeClassIndex;1.13.x.xActingonsingledonorswithincorporationofmolecularoxygen;1.x.x.xOxidoreductases;BiochemicalsandReagents;Luciferase;LuminescentCompounds/DetectionMol文件MolFile結(jié)構(gòu)式熒光素酶性質(zhì)閃點(diǎn)111℃儲(chǔ)存條件-20°C形態(tài)粉末顏色白色熒光素酶用途與合成方法概述生物發(fā)光(Bioluminescence)是在自然界廣泛存在的、有生命的生物產(chǎn)生的一種發(fā)光現(xiàn)象.發(fā)光的生物種類很多,包括發(fā)光細(xì)菌、發(fā)光螢火蟲、發(fā)光魚、發(fā)光海星、發(fā)光甲蟲等.而能催化熒光素或脂肪醛氧化產(chǎn)生生物發(fā)光的一類酶即為熒光素酶(Luciferase).從20世紀(jì)50年代就已經(jīng)開始了對(duì)熒光素酶的研究.從1986年第一個(gè)成功地獲得表達(dá)螢火蟲熒光素酶基因(luc基因)的轉(zhuǎn)基因煙草以來,熒光素酶的應(yīng)用和發(fā)展進(jìn)入了一個(gè)嶄新的時(shí)代.應(yīng)用熒光素酶大大增加了生物發(fā)光免疫分析技術(shù)(BLIA)的靈敏度和應(yīng)用范圍,并且由于具有敏感性高,特異性好,反應(yīng)迅速,操作簡(jiǎn)單,應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),已成為醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)等研究領(lǐng)域中一種新的手段。種類自然界中具有發(fā)光能力的生物種類很多,常見的主要有:發(fā)光蘑菇(ChemicalbookLuminousmushrooms)、發(fā)光蚯蚓(Luminousearthworms、發(fā)光細(xì)菌(Luminousbacteria)、發(fā)光水母(Luminousjellyfish)、發(fā)光甲蟲(Luminousbeetles,它們主要由螢火蟲(fireflies),叩頭蟲(clickbeetles)和歐洲螢(glowworms)3大種類組成)。目前,除發(fā)光蘑菇和發(fā)光蚯蚓的發(fā)光機(jī)理尚不清楚外,其余生物的發(fā)光機(jī)理已研究得較為透徹,并使細(xì)菌熒光素酶(BacterialLuciferase簡(jiǎn)稱BL)和螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase簡(jiǎn)稱FL)形成商品酶用于分析檢測(cè)。應(yīng)用熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)也可以作為細(xì)菌熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)的一個(gè)替代,特別是對(duì)監(jiān)測(cè)環(huán)境應(yīng)激具有重要意義.由于應(yīng)用熒光素酶的成本低、應(yīng)用范圍廣,所以被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)某些特殊細(xì)菌、厭氧微生物,監(jiān)控生長(zhǎng)緩慢的微生物,用于食品、飲料、自來水、化妝品、藥物檢測(cè),河流水質(zhì)、大氣環(huán)境的監(jiān)測(cè)。制備作為FL生產(chǎn)原料的螢火蟲,要依靠人工捕捉或養(yǎng)殖,受地域和季節(jié)性限制,且該生物生產(chǎn)周期長(zhǎng)、養(yǎng)殖成本高、提取的酶成分復(fù)雜,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人們轉(zhuǎn)向用基因工程的方法進(jìn)行生產(chǎn)。1985年,deWet,J.R.等首次克隆了P.Pyralis的FL基因,并在大腸桿菌(Escherichiacoli)中表達(dá),從中得到具有活性的FL。1986年,他們測(cè)定了FL基因的cDNA序列。隨后,各種發(fā)光甲蟲的FL基因相繼克隆成功,并能在原核和真核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)。取自P.Pyralis長(zhǎng)約1.8kb的cDNA基因在E.coli表達(dá)的產(chǎn)物是分子量為62kD,含550個(gè)氨基酸的多肽鏈,與自然提取得到的FL相比,具有同樣的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)特性和發(fā)射波長(zhǎng),在相同的反應(yīng)條件下酶的穩(wěn)定性亦無差異。螢火蟲熒光素酶基因通過克隆在E.coli表達(dá),轉(zhuǎn)化體在37℃、LB培養(yǎng)基中生長(zhǎng)到對(duì)數(shù)后期收集菌體,用滲透壓法、凍融法提取細(xì)菌胞質(zhì)組分,經(jīng)均質(zhì)、離心,用凝膠排阻、離子交換色譜提取純酶,冷凍干燥保存。BL可從培養(yǎng)發(fā)光細(xì)菌直接提取得到,其制備方法與FL類似。從V.harveyi中提取的酶活可達(dá)1.8×1011LU/mg,為獲得特殊用途的BL,亦可通過誘變或基因克隆得到。各種發(fā)光細(xì)菌的基因克隆均有許多報(bào)道。生物活性Luciferase,firefly是一種發(fā)光酶,負(fù)責(zé)螢火蟲和磕頭蟲的生物發(fā)光。體外研究Fireflyluciferaseisthelight-emittingenzymeresponsibleforthebioluminescenceoffirefliesandclickbeetles.Theenzymecatalysestheoxidationoffireflyluciferin,requiringoxygenandATP.BecauseoftherequirementofATP,fireflyluciferaseshavebeenusedextensivelyinbiotechnology.


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